Schizosaccharomyces pombe에서 RNase P의 부분 정제.

분열 효모인 Schizosaccharomyces pombe에서 리보뉴클레아제 P를 DEAE-셀룰로스 및 인산셀룰로스 컬럼 크로마토그래피를 사용하여 부분 정제하였다. 효모 RNase P 효소는 대장균 tRNATyr 전구체를 절단하여 성숙한 5' 말단을 포함하는 tRNATyr를 생성한다. 효소 활성이 뉴클레아제로 처리한 후 억제되며, 이는 활성을 위한 뉴클레오타이드 성분이 필요함을 나타낸다. 효소 정제는 합성된 방사선 동위원소인 ApApApCOH가 E. coli tRNAfMet의 5' 말단 인산기에 결합되어 사용됨으로써 크게 촉진되었다. (p는 32P 인산기를 의미한다.) 이 기질은 효모 RNase P에 의해 성숙한 tRNA와 사중 뉴클레오타이드 트리포스페이트인 ApApApCOH로 절단되었다. 합성 기질을 이용함으로써 ApApApC 생성물의 삼염화아세트산 용해도를 측정하는 간단한 분석 절차를 사용할 수 있었으며, 이는 반응 생성물의 더 번거로운 겔 전기영동 분리를 피할 수 있게 해준다.