Key points are not available for this paper at this time.
الملخص. يعد النقل بالتبني لخلايا T التنظيمية (Tregs) استراتيجية واعدة لمكافحة الأمراض المناعية في زراعة الأعضاء والأمراض المناعية الذاتية. تعتبر خلايا Tregs المحددة للأنتيجينات أكثر فعالية في تعديل الاستجابات المناعية غير المرغوب فيها، لكن ترددها المنخفض في الدم المحيطي يشكل تحديات لتصنيعها وتطبيقها السريري. تم استخدام مستقبلات الأنتيجينات الكيميرية (CARs) لإعادة توجيه خصوصية خلايا Tregs، باستخدام متجهات فيروسية عكسية. ومع ذلك، فإن نقل الجينات الفيروسي العكسي مكلف و يستغرق وقتًا طويلًا ويثير مسائل تتعلق بالسلامة. هنا، نحن نستكشف تعديل الجين غير الفيروسي لإعادة توجيه خلايا Tregs باستخدام CARs، مع استخدام تركيبات محددة لـ HLA-A2 لدراسات إثبات المفهوم في نماذج الزراعة. نقدم نهج CRISPR-Cas12a خالٍ من الفيروسات لدمج مجال ربط الأنتيجين في جين CD3 epsilon (CD3ε)، مما ينتج عنه خلايا Tregs تعبّر عن تركيبة اندماج مستقبلات خلايا T (TruC). تظهر خلايا CD3ε -TruC Tregs تنشيطًا قويًا يعتمد على الأنتيجين مع الحفاظ على استجابتها لتحفيز TCR/CD3. هذا يمكّن من تعزيز تفضيلي لخلايا Tregs المُعاد توجيهها بواسطة TruC من خلال تحفيز متكرر CD3/CD28 في نظام توسيع يتوافق مع GMP. احتفظت خلايا CD3ε -TruC Tregs المعدلة جينيًا غير الفيروسية بهويتها الظاهرة، والوراثية، والوظيفية. في نموذج الفئران المعزولة، تظهر خلايا CD3ε -TruC Tregs المحددة لـ HLA-A2 حماية متفوقة للطعوم الجلدية HLA-A2 + الغريبة من الرفض مقارنةً بخلايا Tregs متعددة النسائل. يوفر هذا النهج طريقًا لتطوير منتجات خلايا Treg معتمدة على CD3ε -TruC لعلاج المناعة زراعة الأعضاء وغيرها من الأمراض المناعية.
درس دو وزملاؤه (Mon,) هذا السؤال.