تنظم مجالات المفصلة والغشاء الخلوي في مستقبلات المستضد الشيميرية التعبير عن المستقبلات وعتبة الإشارة

أثبتت خلايا T المستقبلية للمستضد الشيميري (CAR-T) إمكانات سريرية كبيرة؛ ومع ذلك، قد تؤدي نشاطها المضاد للأورام القوي إلى آثار جانبية شديدة. لضمان فعالية وأمان علاج خلايا CAR-T، من المهم فهم العلاقة بين هيكل CAR ونشاطه. لتوضيح دور مجالات المفصلة والغشاء في وظيفة CAR وخلايا CAR-T، أنشأنا هياكل شيميرية مختلفة وحللنا مستويات تعبيرها ونشاطها النوعي تجاه المستضد على خلايا CAR-T. أولاً، قمنا بإنشاء CAR أساسي بمفصلة ومجالات غشاء وتنقل إشارة مستمدة من CD3ζ، ثم أنشأنا ستة متغيرات CAR كانت مفصلتها أو مجالات المفصلة/الغشاء مستمدة من CD4 وCD8α وCD28. تأثر مستوى التعبير عن CAR واستقراره بشكل كبير بمعدل الغشاء بدلاً من مجال المفصلة. كانت الوظائف الخاصة بالمستضد لمعظم خلايا CAR-T تعتمد على مستويات تعبير CAR الخاصة بها. ومع ذلك، أظهرت CARs ذات مجال مفصل مستمد من CD8α أو CD28 اختلافات كبيرة في وظيفة خلايا CAR-T، على الرغم من مستويات التعبير المتساوية. تشير هذه النتائج إلى أن شدة إشارة CAR إلى خلايا T تأثرت ليس فقط بمستوى تعبير CAR، ولكن أيضاً بميدان المفصل. تشير اكتشافاتنا إلى أن مجال المفصل ينظم عتبة إشارة CAR وأن مجال الغشاء ينظم كمية إشارة CAR عن طريق التحكم في مستوى تعبير CAR.