Key points are not available for this paper at this time.
تعد خلايا T التنظيمية من النوع CD4+ (Tregs) وسطاء رئيسيين للتحمل المناعي وخلايا فعالة واعدة للعلاج الخلوي المتبني المثبط للمناعة لمكافحة المناعة الذاتية والالتهاب المزمن. تعتبر استقرارها الوظيفي أمرًا حاسمًا لفائدتها السريرية وقد تم ربطه بالحالة غير الميثيلة لعنصر تعزيز TSDR/CNS2 في عامل النسخ FOXP3. ومع ذلك، فإن الأدلة على مساهمة ميثيل TSDR في استقرار FOXP3 وتحفيز Treg لا تزال مفقودة حتى الآن. لقد أنشأنا هنا طريقة قوية لتحرير الجينات تعتمد على CRISPR-Cas9 لإزالة الميثيل بشكل انتقائي من TSDR داخل البيئة الكروماتينية الذاتية لخلايا حية. كانت الحالة المنزعة الميثيل مستقرة على مدى أسابيع في ثقافات تكاثر T الخلوية حتى بعد توقف التعبير عن المركب المعدل. أدى التحرير الجيني لـ TSDR إلى تعبير FOXP3، حتى في توزيعه الفيزيولوجي المتنوع، مما يثبت دورًا سببيًا لتقليل الميثيل في تنظيم FOXP3. ومع ذلك، لم تكن التحفيز الناجح لـ FOXP3 مرتبطًا بالتحول نحو ظاهرة Treg وظيفية، على عكس ما تم الإبلاغ عنه من طرق زيادة FOXP3. وبالتالي، فإن إزالة ميثيل TSDR لازمة، لكنها غير كافية لتحفيز سمة Treg مستقرة. لذلك، قد تكون إزالة الميثيل المستهدفة لـ TSDR إضافة حاسمة للبروتوكولات المنشورة لتحفيز Treg التي تفتقر حتى الآن لاستقرار FOXP3.
درس كريسلي وآخرون (الخميس) هذا السؤال.