Key points are not available for this paper at this time.
تم فحص حجم البروتين والتفاعل الكهربائي والثبات التوافقي للإيتانيرسيبت (المُسَوَّق تحت اسم Enbrel®) من خلال طرق الديناميكا الحرارية وتشتت الضوء مع تغيير الرقم الهيدروجيني وتركيز العازل. مع زيادة الرقم الهيدروجيني للإيتانيرسيبت من 6.6 إلى 8.6، زاد التنافر الكهربائي في المحلول، مما أدى إلى تقليل حجم البروتين. ومع ذلك، تغير الحجم بشكل أقل في تركيز العازل العالي ولم تُلاحظ مشكلات التجميع غير القابلة للعكس؛ على العكس من ذلك، أُحيطت الأكوام بحجم حوالي 1000 نانومتر في تركيز العازل المنخفض ضمن النطاق الهيدروجيني. تم ملاحظة ثلاث انتقالات هامة في التفكيك (Tm) بواسطة المسح الحراري التفاضلي (DSC). على عكس Tm1، زادت Tm2 وTm3 مع زيادة الرقم الهيدروجيني. لوحظ Tm أعلى عند تركيز عازل مرتفع، مما يشير إلى زيادة الاستقرار التوافقي. تم التحقيق في الطاقة النشطة الظاهرة للتفكيك حيث أن الزيادة المستمرة في Tm2 وTm3 لم تكن كافية لتحديد الظروف المثلى. تم حساب حاجز طاقة أعلى عند Tm2 مقارنة بـ Tm3. بالإضافة إلى ذلك، كانت حواجز الطاقة الأعلى عند الرقم الهيدروجيني من 7.4 إلى 7.8 حيث لوحظ أيضًا Tm1 أعلى. لذلك، تغير الاستقرار التوافقي لمحلول البروتين بشكل كبير مع التنافر المكاني المعتمد على الرقم الهيدروجيني لجزيئات البروتين المجاورة. تم الحصول على نطاق الرقم الهيدروجيني المُحسَّن الذي يرضي استقرار جميع المجالات الثلاثة. أدت الظروف الكهروستاتيكية والتفاعلات الهيكلية إلى التجميع غير القابل للعكس عند تركيزات عازل منخفضة وتم قمعها عن طريق زيادة التركيز. لذلك، يُوصى بزيادة تركيز العازل أثناء تطوير صياغة البروتين، حتى في المراحل المبكرة من البحث، لتجنب مشكلات استقرار البروتين.
درس كيم وزملاؤه (الأربعاء) هذا السؤال.