생체 내 DNA 합성을 빠르고 민감하게 검출하기 위한 화학적 방법

우리는 5-에티닐-2'-디옥시유리디네(EdU)의 통합을 기반으로 증식하는 세포에서 DNA 합성을 검출하는 방법을 개발했습니다. 이 방법은 Cu(I) 촉매 3 + 2 환화반응(‘클릭’ 화학)을 통해 형광 아자이드를 이용한 후속 검출을 통해 이루어집니다. EdU 표지를 검출하는 것은 높은 민감도를 가지며 몇 분 안에 완료할 수 있습니다. 검출에 사용되는 형광 아자이드의 작은 크기는 샘플 침투도를 높여 대형 조직 및 장기 이식체의 전체 도말 준비물 염색을 가능하게 합니다. BrdU와 대조적으로, 이 방법은 샘플 고정이나 DNA 변성을 필요로 하지 않으며, 구조적 보존을 좋게 합니다. 우리는 배양된 세포와 전체 동물의 장과 뇌에서 이 방법의 사용을 입증합니다.