벤젠이 없는 아디픽산 합성

D-글루코스에서 cis,cis-무코닉산을 합성하는 대장균 균주가 구축되고 평가되었다. 생성된 발효액에서 cis,cis-무코닉산의 화학 수소화도 조사되었다. 글루코스에서 아디픽산의 생촉매 합성은 산업 아디픽산 제조의 특징인 두 가지 환경적 문제를 제거한다: 발암성 벤젠 및 벤젠 유래 화학물질을 원료로 사용하는 것과 질산 촉매 산화의 부산물로서의 아산화질소 생성. 질산의 사용을 없애는 대체 촉매 합성이 개발되었지만, 대부분은 여전히 석유 유래 벤젠을 궁극적인 원료로 의존하고 있다. 본 연구에서는 대장균 WN1/pWN2.248이 개발되어 48시간의 배양 후 22% (mol/mol) 수율로 글루코스에서 36.8 g/L의 cis,cis-무코닉산을 합성하였다. 미생물 cis,cis-무코닉산 합성 최적화에는 E. coli에서 일반적으로 발견되지 않는 세 가지 효소의 발현이 필요했다. DHS 탈수소효소를 인코딩하는 Klebsiella pneumoniae aroZ 유전자의 두 개 복제본이 대장균 염색체에 삽입되었고, PCA 탈탄산효소를 인코딩하는 K. pneumoniae aroY 유전자와 카테콜 1,2-디오세나제를 인코딩하는 Acinetobacter calcoaceticus catA 유전자는 염색체 외 플라스미드에서 발현되었다. WN1/pWN2.248의 배양이 완료된 후, 세포는 broth에서 제거되었으며, 활성화된 숯으로 처리되고 가용성 단백질을 제거하기 위해 여과되었다. 그 결과 생성된 용액을 3400 kPa의 H2 압력 하에서 10% Pt가 포함된 탄소(5% mol/mol)로 2.5시간 수소화한 결과 97% (mol/mol)의 cis,cis-무코닉산의 아디픽산으로의 전환이 이루어졌다.