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El CLEM en resina de muestras incrustadas en Epon puede simplificar en gran medida la correlación de imágenes fluorescentes con micrografías electrónicas. La utilidad de esta técnica está limitada actualmente por el bajo número de proteínas fluorescentes que resisten el procesamiento de CLEM. Además, ningún estudio ha reportado la posibilidad de CLEM en resina de dos colores de células incrustadas en Epon. En este estudio, examinamos proteínas fluorescentes monoméricas verdes y rojas que resisten el procesamiento de CLEM. Identificamos mWasabi, variante CoGFP 0 y mCherry2; dos proteínas fluorescentes verdes y una roja como alternativas para el CLEM en resina. Expresamos mCherry2 localizado en mitocondrias y histona H2B etiquetada con la variante CoGFP 0 en células. Se detectó fluorescencia verde y roja en secciones delgadas de 100 nm de las células incrustadas en Epon. En las mismas secciones delgadas, correlacionamos las señales fluorescentes con mitocondrias y el núcleo utilizando un microscopio electrónico de barrido. Resultados similares se obtuvieron cuando se expresaron mCherry2 localizado en el retículo endoplásmico y la histona H2B etiquetada con la variante CoGFP 0 en las células. También se logró CLEM en resina de dos colores de dos orgánulos citoplasmáticos, mitocondrias y retículo endoplásmico, utilizando mCherry2 localizado en mitocondrias y mWasabi localizado en el retículo endoplásmico. En resumen, reportamos tres nuevas alternativas de proteínas fluorescentes adecuadas para CLEM en resina de muestras incrustadas en Epon y logramos CLEM en resina de dos colores basado en Epon.
Tanida et al. (Mon,) estudiaron esta cuestión.