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August 17, 2025

RT-PCR automatizado de alto rendimento v2

AVAlex VeithUniversity of Wisconsin–Madison ASAnna L. ShenUniversity of Wisconsin–Madison CBChristopher BradfieldUniversity of Wisconsin–Madison

Key Points

RT-PCR automatizado de alto rendimento produz resultados consistentes com mínima variabilidade entre replicatas técnicas, garantindo confiabilidade.
O método dispensa 2 μL de RNA diluído e 8 μL de master mix para reações de 10 μL em uma placa de PCR de 384 poços, aumentando o rendimento.
A configuração envolve um programa de template pré-escrito adaptado para múltiplos alvos de expressão gênica, simplificando o processo.
A arrumação eficiente de RNA diluído em uma placa de 96 poços permite um manuseio eficiente e uso ideal de recursos.

Abstract

Este protocolo fornece um esboço para planejar, configurar e realizar um epMotion® M5073 para RT-PCR de alto rendimento. Este protocolo aproveita um conjunto de programas de template pré-escritos para acomodar diferentes números de alvos de expressão gênica. Os programas de template foram projetados para dispensar 2 μL de RNA diluído e 8 μL de master mix de uma etapa (incluindo primers e sondas) para criar reações de 10 μL em uma placa de PCR de 384 poços. O RNA diluído deve ser organizado em uma placa de PCR de 96 poços para eficiência. Também fornecemos os passos necessários para criar execuções personalizadas de RT-PCR para usuários mais avançados. Esses passos também detalham as configurações usadas em nossos programas predefinidos. Os usuários podem esperar resultados consistentes com mínima variabilidade entre replicatas técnicas que são rápidas e confiáveis.

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