Contexto: A anoikis é uma forma de morte celular programada desencadeada pelo desprendimento de células da matriz extracelular. A resistência à anoikis representa um fator crítico na metástase tumoral, e elucidar os mecanismos pelos quais as células cancerosas epiteliais evitam esse processo pode fornecer uma visão molecular para direcionar efetivamente a progressão metastática. Métodos: Apresentamos aqui um fluxo de trabalho experimental e um protocolo detalhado para examinar a sensibilidade à anoikis em células tumorais, tanto in vitro quanto in vivo. Descrevemos um modelo de anoikis induzido por desprendimento, um sistema de cultura esferoide tridimensional e um ensaio in vivo de células tumorais circulantes, utilizando a linha celular de carcinoma pulmonar humano A549 como sistema modelo. Detalhamos as condições de cultura celular, materiais e preparação de amostras, além da avaliação e quantificação da anoikis. Juntas, essas metodologias fornecem uma abordagem abrangente para investigar a resistência à anoikis. Conclusão: Este protocolo oferece insights valiosos sobre os mecanismos subjacentes à resistência à anoikis e pode facilitar a identificação de novos alvos terapêuticos para o tratamento do câncer.
Han et al. (Terç,) estudaram essa questão.