O gene da proteína surfactante C mutado L184Q humanizado altera o destino das células epiteliais alveolares tipo 2

As células epiteliais alveolares tipo 2 (AT2) sintetizam a proteína surfactante C (SPC) e repararam um epitélio alveolar lesionado. Um gene da proteína surfactante C mutado (SftpcL184Q, ID do gene: 6440) em recém-nascidos foi associado à síndrome do desconforto respiratório e à fibrose pulmonar. No entanto, os mecanismos subjacentes que causam mutações no gene Sftpc para regular a linhagem AT2 permanecem obscuros. Utilizamos organoides AT2 livres de suporte tridimensionais (3D) in vitro para simular o epitélio alveolar e comparamos as características da linhagem AT2 entre camundongos WT (C57BL/6) e camundongos mutantes SftpcL184Q usando ensaios de formação de colônia, imunofluorescência, citometria de fluxo, qRT-PCR e ensaios de Western blot. O número de AT2 foi significativamente reduzido em camundongos SftpcL184Q. O número de organoides e a eficiência na formação de colônias foram significativamente atenuados nas culturas 3D de células AT2 primárias SftpcL184Q em comparação com as dos camundongos WT. A expressão de podoplanina (PDPN, marcador de célula alveolar tipo 1 (AT1)) e a contagem celular transitória foram significativamente aumentadas em organoides SftpcL184Q em comparação aos camundongos WT. Os níveis de expressão de CD74, proteína de choque térmico 90 (HSP90) e proteína ribossômica S3A1 (RPS3A1) não foram significativamente diferentes entre células AT2 WT e SftpcL184Q. Este estudo demonstrou que a mutação humanizada SftpcL184Q regula intrinsicamente a linhagem AT2. Essa regulação é independente das vias de CD74, HSP90 e RPS3A1.