EVs derivados de cardiomiócitos adultos para o tratamento da fibrose cardíaca

Resumo A fibrose cardíaca é uma característica patológica comum das doenças cardiovasculares que surge da hiperativação de fibroblastos e da deposição excessiva de matriz extracelular (MEC), levando à função cardíaca comprometida e potencialmente à insuficiência cardíaca ou arritmia. Vesículas extracelulares (EVs) liberadas por cardiomiócitos (CMs) regulam várias funções fisiológicas essenciais para a homeostase miocárdica, que são afetadas na doença cardíaca. Portanto, EVs derivados de CMs saudáveis representam uma terapia promissora livre de células para o tratamento da fibrose cardíaca. Para isso, otimizamos as condições de cultura de CMs humanos adultos para obter um grande rendimento de EVs sem comprometer a integridade celular, utilizando uma combinação definida de pequenas moléculas. Os EVs foram isolados por ultracentrifugação, e suas características foram analisadas. Por fim, seu efeito sobre a fibrose foi testado. O tratamento de fibroblastos cardíacos humanos ativados por TGFβ com EVs derivados de CMs utilizando nosso sistema de cultura resultou em uma diminuição nos marcadores de ativação de fibroblastos e na acumulação de MEC. O fenótipo resgatado foi associado a uma carga específica de EVs, incluindo múltiplos microRNAs específicos de miocitos e antifibróticos, embora seu efeito individualmente não tenha sido tão eficaz quanto o tratamento com EVs. Notavelmente, a análise de vias mostrou que o tratamento com EVs reverteu a transcrição de fibroblastos ativados e diminuiu várias vias de sinalização, incluindo MAPK, mTOR, JAK/STAT, TGFβ e PI3K/Akt, todas envolvidas no desenvolvimento da fibrose. A injeção intracárdica de EVs derivados de CMs em um modelo animal de fibrose cardíaca reduziu a área fibrosa e aumentou a angiogênese, o que se correlacionou com a melhora da função cardíaca. Essas descobertas sugerem que EVs derivados de CMs humanos adultos podem oferecer um tratamento direcionado e eficaz para a fibrose cardíaca, devido às suas propriedades antifibrosas e à especificidade da carga.