METTL3 Promove a Senescência de Células do Núcleo Pulposo na Degeneração do Disco Intervertebral Regulando a Metilação m6A do TLR2 e a Microbiota Intestinal

Resumo Contexto A senescência das células do núcleo pulposo (NPC) no tecido do disco intervertebral (IVD) é a principal causa patológica da degeneração do disco intervertebral (IDD). A metilação de N6-metiladenosina (m6A) e a microbiota intestinal desempenham papéis importantes na progressão da IDD. Este estudo investigou se a metiltransferase-like 3 (METTL3) regula a modificação m6A do TLR2 e a microbiota intestinal para influenciar a senescência das NPCs. Métodos Um modelo de rato com IDD foi estabelecido por punção do IVD lombar e as NPCs foram desafiadas com IL-1β para simular lesão do IVD. Ratos com IDD e NPCs expostas ao IL-1β foram tratados com lentivírus interferente de METTL3 e o agonista TLR2 Pam3CSK4. As mudanças na composição da microbiota intestinal dos ratos foram analisadas e procedimentos de transplante de microbiota fecal foram utilizados. A senescência das NPCs, o ciclo celular e a expressão dos fatores do fenótipo secretor associado à senescência (SASP) foram avaliados. O enriquecimento de m6A do TLR2 e a ligação do IGF2BP1 ao mRNA do TLR2 foram examinados. Resultados METTL3 e TLR2 estavam altamente expressos em ratos com IDD. O silenciamento de METTL3 atenuou os fenótipos senescentes e reduziu a secreção dos fatores SASP. Pam3CSK4 reverteu os efeitos benéficos do silenciamento de METTL3 na senescência das NPCs e na lesão do IVD. O METTL3 estabilizou o mRNA do TLR2 de maneira dependente do IGF2BP1. O silenciamento de METTL3 restaurou os níveis específicos da microbiota intestinal em ratos com IDD, que foram ainda revertidos pela administração de Pam3CSK4. A microbiota fecal de ratos com IDD silenciados para METTL3 alterou os fenótipos patológicos de ratos com IDD. Conclusões Estes resultados demonstram os efeitos benéficos do silenciamento de METTL3 na senescência das NPCs e na melhoria da lesão do IVD, envolvendo a modulação da modificação m6A do TLR2 e da microbiota intestinal. Estas descobertas apoiam o silenciamento de METTL3 como um alvo terapêutico potencial para IDD.