Aprimorando o tratamento do câncer de pulmão de células não pequenas utilizando vesículas extracelulares derivadas de células natural killer (NKEVs) como uma nova terapia celular adotiva.

e20079 Contexto: Um mecanismo estabelecido que contribui para a falha da terapia com inibidores de checkpoint imunológico (ICI) é a evasão do tumor das respostas das células T através da downregulação do antígeno leucocitário humano (HLA). Por outro lado, a função efetora das células Natural Killer (NK) é aumentada na ausência da expressão de HLA, tornando as terapias celulares baseadas em NK uma opção atraente para tumores resistentes a ICI. Vesículas extracelulares derivadas de NK (NKEVs) têm o potencial de se tornarem uma terapia celular adotiva personalizada que pode superar desafios associados às terapias tradicionais baseadas em células NK que falham em fornecer números adequados de células ao tumor. Buscamos investigar a eficácia pré-clínica de uma abordagem utilizando a isolamento seletivo de células NK e a colheita de NKEVs em NSCLC. Métodos: De 10 pacientes com NSCLC, o tecido tumoral foi coletado e células mononucleares do sangue (PBMCs) foram recuperadas antes e após a cirurgia. O sequenciamento de RNA de célula única (scRNAseq) foi utilizado para examinar a paisagem celular em PBMCs e no tecido tumoral. As células NK foram isoladas de PBMCs, expandidas in vitro, e NKEVs foram coletadas, com o RNA e a carga proteica das EV caracterizadas usando proteômica e transcriptômica. As capacidades funcionais das NKEVs derivadas de pacientes foram testadas com organoides derivados de pacientes. Resultados: O scRNAseq destacou uma heterogeneidade celular significativa, particularmente na população de células cancerosas. Dentro do tumor, as células imunológicas infiltrantes eram de origem linfoide e mieloide. Mais de 200.000 PBMCs foram analisadas com scRNAseq, revelando diferenças associadas ao subtipo do câncer, carga mutacional do tumor e ponto temporal experimental. A exposição ao tratamento com NKEV dos pacientes resultou em uma diminuição de 40-45% na viabilidade dos organoides, reduzindo significativamente a dose de cisplatina necessária para elicitar uma resposta citotóxica. NKEVs derivadas de controles saudáveis foram menos eficientes. Em experimentos de co-cultura de organoides de PBMCs tratados com Nivolumabe, a adição de NKEV aumentou a proporção de células T CD8+ infiltrantes e células NK CD56+ em comparação com inibidores de PD-1 isoladamente, especialmente a partir dos PBMCs antes da ressecção tumoral. Conclusões: Este trabalho demonstrou que NKEVs podem ser colhidas com sucesso de células NK expandidas derivadas de pacientes e destacou suas propriedades antitumorais em combinação com terapias padrão. Análise imunológica adicional aprofundada será apresentada. Tabela: veja o texto.