Parse Evercode WT -- TMCs da Universidade de Minnesota v1

A codificação combinatorial é um método sem instrumentação utilizado para gerar bibliotecas de sequenciamento de RNA de células individuais e núcleos únicos. Aqui são descritos os métodos utilizados para isolar núcleos únicos de tecido congelado; para fixar núcleos após a isolação; para ligar códigos de barras específicos de núcleo ao cDNA de transcritos, dividindo e agrupando iterativamente as suspensões de núcleos entre várias placas de 96 poços via o sistema Evercode WT; e para preparar cDNA com código de barras para sequenciamento por síntese (SBS). O seguinte protocolo foi adaptado a partir de protocolos desenvolvidos pela 10x Genomics, Parse Biosciences e Illumina para ser utilizado nos TMCs da Universidade de Minnesota em colaboração com o Centro de Genômica da Universidade de Minnesota. Esses protocolos pertencem às respectivas empresas e estão sujeitos a revisão periódica.