Estudo mecanístico da apoptose mediada por proteínas de choque térmico 60 em células DF-1

As proteínas de choque térmico (HSP) são um grupo de chaperonas moleculares altamente conservadas encontradas em vários organismos e têm sido associadas à tumorigenese, progressão tumoral e metástase. No entanto, a relação entre HSP60 e apoptose permanece elusiva. O objetivo deste estudo foi explorar o papel e os mecanismos regulatórios da apoptose em resposta à expressão alterada de HSP60. Geramos linhagens celulares DF-1 tanto de superexpressão de HSP60 quanto de knockdown e avaliamos seu impacto nos níveis de apoptose usando análises de ELISA e citometria de fluxo. Adicionalmente, examinamos os níveis de expressão de transcrição e proteína de fatores de sinalização relacionados à apoptose usando PCR quantitativo por fluorescência (qPCR) e análises de Western blotting. A superexpressão de proteínas de choque térmico 60 levou a uma diminuição significativa nos níveis de apoptose em células DF-1, o que pode ser atribuído à regulação negativa da expressão de BAX e BAK, à regulação positiva de Bcl-2 e à diminuição da expressão de Caspase 3. Por outro lado, o knockdown de HSP60 levou a um aumento substancial nos níveis de apoptose em células DF-1, facilitado pela regulação negativa da expressão de BAX e Bcl-2, e pela regulação positiva da expressão de BAK, que aumentou os níveis de Caspase 3, promovendo assim a apoptose. Os achados do nosso estudo fornecem a primeira evidência do efeito inibitório de HSP60 na apoptose em células DF-1. Essas observações têm implicações significativas para a progressão da doença e a pesquisa sobre o câncer, com potenciais aplicações médicas.