A sintase de pineno é um biocatalisador crucial para a produção microbiana de (+)-α-pineno, um repelente de insetos natural e um aprimorador verde de pesticidas. No entanto, sua baixa eficiência catalítica impede a aplicação industrial. Empregamos uma combinação de alinhamento de sequências homólogas e engenharia guiada por estrutura para identificar mutações chave (H345F, S372C e C527S) que aumentaram significativamente a atividade enzimática. O mutante duplo H345F/S372C aumentou o teor de (+)-α-pineno para 273,66 mg/L, 3,38 vezes maior que o tipo selvagem, com uma melhoria de 3,10 vezes na eficiência catalítica. Análises estruturais e computacionais revelaram que as mutações otimizaram o canal de substrato e reforçaram a rigidez do bolso hidrofóbico, melhorando a ligação do substrato e a estabilidade da enzima. Esta enzima engenheirada oferece uma rota biossintética eficiente para a produção sustentável de agrotóxicos.
Li et al. (Qui,) estudaram esta questão.
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