A imagem molecular é uma ferramenta útil para a validação in vivo de terapias com anticorpos. Ela mostra as propriedades de acúmulo de anticorpos em tumores e órgãos que não podem ser previstas usando ensaios in vitro. Dois problemas na caracterização de anticorpos usando imagem in vivo são: (i) o sinal fluorescente do anticorpo é sensível à sua profundidade no tecido, e (ii) há grandes variabilidades biológicas observadas em estudos de imagem in vivo. A imagem de agente pareado mede a fluorescência de um anticorpo de teste e um anticorpo de controle no mesmo animal, permitindo que a fluorescência do anticorpo de teste seja normalizada em relação à do anticorpo de controle. Nós usamos a imagem de agente pareado para comparar as propriedades de imagem in vivo de duas variantes de afinidade maturada do anticorpo anti-EGFR nimotuzumabe (K4 e K5) com o anticorpo parental. Para realizar a imagem de agente pareado, rotulamos os anticorpos de teste (K4 e K5) com IRDye800CW e o anticorpo de controle (nimotuzumabe) rotulado com IRDye680RD, e os co-injetamos em camundongos portadores de xenotransplantes positivos para EGFR. A imagem fluorescente no infravermelho próximo foi utilizada para quantificar a quantidade relativa de cada anticorpo presente em tumores e órgãos. A imagem de agente pareado nos permitiu detectar diferenças na fluorescência in vivo entre K4, K5 e nimotuzumabe, onde K5 apresentou o maior acúmulo no tumor, seguido por K4 e nimotuzumabe.
Bernhard et al. (Quarta,) estudaram essa questão.