Hsp70 Inibe Apoptose Induzida por Calor a Montante das Mitocôndrias Ao Prevenir a Translocação de Bax

A superexpressão de Hsp70 pode proteger células da apoptose induzida por estresse. Nossa observação anterior de que Hsp70 inibe a liberação de citocromo c em células estressadas por calor nos levou a examinar eventos que ocorrem a montante da desagregação mitocondrial. Neste estudo, examinamos os efeitos do choque térmico no membro da família Bcl-2 pró-apoptótico Bax devido ao seu papel central na regulação da liberação de citocromo c em células estressadas. Descobrimos que o choque térmico causou uma mudança conformacional em Bax que leva à sua translocação para as mitocôndrias, associação estável à membrana e oligomerização. Todos esses eventos foram inibidos em células que apresentavam níveis elevados de Hsp70. Hsp70 não interagiu fisicamente com Bax em células controle ou estressadas por calor, indicando que Hsp70 atua para suprimir sinais que levam à ativação de Bax. Hsp70 inibiu a ativação de JNK induzida por estresse e a inibição de JNK com SP600125 ou pela expressão de um mutante dominante negativo de JNK bloqueou a translocação de Bax tão efetivamente quanto a superexpressão de Hsp70. Hsp70 não protegeu células que expressavam uma forma mutante de Bax que tem capacidade constitutiva de inserção na membrana ou células tratadas com um ativador de molécula pequena da formação do apoptossomo, indicando que não é capaz de prevenir a morte celular após a desagregação mitocondrial e a ativação da caspase. Esses resultados indicam que Hsp70 bloqueia a apoptose induzida por calor principalmente inibindo a ativação de Bax e, assim, prevenindo a liberação de fatores pró-apoptóticos das mitocôndrias. Portanto, Hsp70 inibe eventos que levam à permeabilização da membrana mitocondrial em células estressadas por calor e, assim, controla a decisão de morrer, mas não interfere na morte celular após este evento ter ocorrido.