Caspase-3 é Necessária para a Fragmentação do DNA e Mudanças Morfológicas Associadas à Apoptose

As proteases semelhantes à enzima conversora de interleucina 1beta (caspases) são componentes cruciais das vias de morte celular. Entre as caspases identificadas, a caspase-3 se destaca porque é comumente ativada por numerosos sinais de morte e cliva uma variedade de proteínas celulares importantes. Estudos em camundongos knock-out para caspase-3 mostraram que essa protease é essencial para o desenvolvimento cerebral. Para investigar a necessidade da caspase-3 na apoptose, aproveitamos a linha celular de carcinoma mamário MCF-7, que demonstramos aqui ter perdido a caspase-3 devido a uma deleção de 47 pares de bases dentro do exon 3 do gene CASP-3. Essa deleção resulta na exclusão do exon 3 durante o splicing do pré-mRNA, anulando assim a tradução do mRNA da CASP-3. Embora as células MCF-7 ainda fossem sensíveis ao fator de necrose tumoral (TNF) ou à apoptose induzida por estaurosporina, não foi observada fragmentação do DNA. Além disso, as células MCF-7 em morte celular não apresentaram algumas das características morfológicas distintas típicas das células apoptóticas, como encolhimento e blebbing. A introdução do gene CASP-3 nas células MCF-7 resultou em fragmentação do DNA e blebbing celular após o tratamento com TNF. Esses resultados indicam que, embora a caspase-3 não seja essencial para a apoptose induzida por TNF ou estaurosporina, ela é necessária para a fragmentação do DNA e algumas das mudanças morfológicas típicas das células em apoptose.