Construção de bibliotecas para sequenciamento de próxima geração: Visões gerais e desafios

O sequenciamento de alto rendimento, também conhecido como sequenciamento de próxima geração (NGS), revolucionou a pesquisa genômica. Nos últimos anos, a tecnologia NGS melhorou constantemente, com a redução dos custos e o aumento exponencial do número e da gama de aplicações de sequenciamento. Aqui, examinamos o papel crítico da qualidade da biblioteca de sequenciamento e consideramos os desafios importantes ao preparar bibliotecas NGS a partir de fontes de DNA e RNA. Fatores como a quantidade e as características físicas do material fonte de RNA ou DNA, assim como a aplicação desejada (ou seja, sequenciamento do genoma, sequenciamento direcionado, RNA-seq, ChIP-seq, RIP-seq e metilação) são abordados no contexto da preparação de bibliotecas de sequenciamento de alta qualidade. Além disso, os métodos atuais para preparar bibliotecas NGS a partir de células únicas também são discutidos.