Caracterização bioquímica da NfsA, a principal nitroreductase sensível ao oxigênio da Escherichia coli, que apresenta alta homologia de sequência de aminoácidos com Frp, uma flavina oxidoredutase de Vibrio harveyi

Identificamos o gene nfsA, que codifica a principal nitroreductase insensível ao oxigênio em Escherichia coli, e determinamos sua posição no mapa de E. coli como sendo 19 min. Também purificamos seu produto gênico, NfsA, até a homogeneidade. Foi sugerido que NfsA é uma proteína não globular com um peso molecular de 26.799 e está fortemente associada a um mononucleotídeo de flavina. Sua sequência de aminoácidos é altamente semelhante à de Frp, uma flavina oxidoredutase de Vibrio harveyi (B. Lei, M. Liu, S. Huang e S.-C. Tu, J. Bacteriol. 176:3552-3558, 1994), uma observação que apoia a noção de que as famílias de nitroreductases de E. coli e de flavina redutases de bactérias luminescentes estão intimamente relacionadas na evolução. Embora nenhuma semelhança sequencial apreciável tenha sido detectada entre duas nitroreductases de E. coli, NfsA e NfsB, NfsA exibiu um baixo nível de atividade de flavina redutase e uma ampla especificidade de aceitação de elétrons semelhante à de NfsB. NfsA reduziu nitrofurazona por um mecanismo de ping-pong Bi-Bi, possivelmente para gerar um produto de transferência de dois elétrons.