Direcionamento terapêutico do PRAME com células T mTCRCAR na leucemia mieloide aguda

O Antígeno Preferencialmente Expresso em Melanoma (PRAME), um antígeno câncer-testículo, fornece um alvo ideal para imunoterapia na leucemia mieloide aguda (LMA). Mostramos a expressão do PRAME em um subconjunto significativo de LMA em crianças e adultos e a falta de expressão em hematopoiese normal. Embora seja um antígeno intracelular, desenvolvemos uma abordagem inovadora para direcionar o PRAME usando um construto de receptor de antígeno quimérico (CAR) que codifica um domínio de direcionamento baseado em anticorpos miméticos do receptor de células T (TCR) que visam o complexo peptídeo-HLA. Utilizamos a sequência de anticorpo de um anticorpo mimético de TCR (mTCR) projetado anteriormente, Pr20, que reconhece o peptídeo ALY do PRAME em complexo com HLA-A∗02 e verificamos a expressão do PRAME em linhagens celulares de LMA e em explosões primárias de LMA. Usando a sequência do anticorpo Pr20, desenvolvemos células T CAR (PRAME mTCRCAR T) a serem testadas contra amostras primárias de pacientes com LMA e linhagens celulares de LMA que expressam o antígeno PRAME no contexto da expressão de HLA-A2. Em contraste com controles apropriados, as células T PRAME mTCRCAR demonstram atividade específica de alvo e mediada por HLA in vitro nas linhagens celulares OCI-AML2 e THP-1, linhagens celulares HLA-A2 que expressam o antígeno PRAME e contra amostras primárias de pacientes com LMA. Modelos xenograft derivados de células in vivo tratados com células T PRAME mTCRCAR demonstraram potente eliminação da leucemia e melhor sobrevivência em comparação com controles não modificados de células T. Além disso, a atividade citolítica das células T PRAME mTCRCAR foi aumentada tratando as células-alvo com interferon gama, que aumenta a expressão do antígeno PRAME. Esses resultados demonstram a viabilidade e eficácia de direcionar o PRAME com novas células T PRAME mTCRCAR.