Ovos Embrionados como um Modelo Alternativo de Infecção para Investigar a Virulência de Aspergillus fumigatus

Modelos de infecção são ferramentas essenciais para o estudo da patogênese microbiana. Modelos murinos são considerados o "padrão ouro" para o estudo de infecções in vivo causadas por espécies de Aspergillus, como A. fumigatus. Protocolos moleculares recentemente desenvolvidos permitem a construção rápida de um grande número de mutantes de fungos com deleções, e modelos alternativos de infecção baseados em cultura celular ou invertebrados são amplamente utilizados para triagem desses mutantes a fim de reduzir o número de roedores em experimentos animais. Para preencher a lacuna entre modelos invertebrados e camundongos, desenvolvemos um modelo de infecção alternativo, de baixo custo e fácil de usar para espécies de Aspergillus, baseado em ovos embrionados. O resultado das infecções no modelo de ovo é dependente da dosagem e da idade, e é altamente reproducível. Mostramos que a idade dos embriões afeta a suscetibilidade a A. fumigatus e que o aumento da resistência coincide com a produção alterada de quimiocinas após a infecção. O avanço da doença no modelo pode ser monitorado utilizando a sobrevivência dos ovos e a histologia. Com base em análises patológicas, hipotetizamos que a invasão das membranas embrionárias e dos vasos sanguíneos leva à morte embrionária. Linhagens de mutantes de deleção definidos, anteriormente demonstrados como totalmente virulentos ou parcialmente ou fortemente atenuados em um modelo de camundongo de aspergilose brônquico-pulmonar, mostraram graus comparáveis de atenuação no modelo de ovo. A adição de nutrientes restaurou a virulência reduzida de um mutante que carecia de um gene biossintético, e variações na rota infecciosa podem ser usadas para analisar ainda mais o papel de genes distintos em nosso modelo. Nossos resultados sugerem que ovos embrionados podem ser um modelo de infecção alternativo muito útil para estudar a virulência e patogenicidade de A. fumigatus.