Avaliação da estabilidade fenotípica e funcional da linha celular RAW 264.7 através de passagens seriadas

Linhas celulares estabelecidas são amplamente utilizadas na pesquisa, no entanto, uma questão intrigante é a comparabilidade das células entre vários laboratórios, suas características e estabilidade ao longo do tempo. Também é problemática a má identificação da linha celular, mudanças genéticas e fenotípicas ou contaminação por micoplasma, que muitas vezes são esquecidas em artigos de pesquisa. A linha celular semelhante a monócitos/macrófagos RAW 264.7 tem sido uma das linhas celulares mieloides mais comumente usadas por mais de 40 anos. Apesar de sua estabilidade fenotípica e funcional ser frequentemente discutida na literatura ou em vários painéis de discussão científica, sua estabilidade durante as passagens consecutivas não foi confirmada em nenhum estudo sólido. Até agora, apenas algumas características funcionais dessas células foram estudadas, por exemplo, sua capacidade de diferenciar em osteoclastos. Portanto, no presente artigo, investigamos a estabilidade fenotípica e funcional da linha celular RAW 264.7 da passagem nº 5 até a passagem nº 50. Descobrimos que o fenótipo (expressão de genes característicos de macrófagos e marcadores de superfície específicos) e as características funcionais (fagocitose e produção de NO) da linha celular RAW 264.7 permanecem estáveis através das passagens: da passagem nº 10 até a passagem nº 30. No geral, nossos resultados indicaram que a linha celular RAW 264.7 não deve ser utilizada após a passagem nº 30, caso contrário, isso pode influenciar a confiabilidade dos dados.