QUANTIFICAÇÃO ENZIMÁTICA DE (1→3) (1→4)-β-D-GLUCANO EM CEVADA E MALTE

Um método simples e quantitativo para a determinação de (1→3) (1→4)-β-D-glucano em farinha de cevada e malte é descrito. O método permite a análise direta de β-glucano em suspensões de farinha e malte. O β-glucano de ligação mista é especificamente depolimerizado com uma (1→3) (1→4)-β-D-glucanase (lichenase) altamente purificada, de Bacillus subtilis, para oligossacarídeos de tri-, tetra- e grau de polimerização (d.p.) superior. Esses oligossacarídeos são então hidrolisados especificamente e quantitativamente a glicose usando β-D-glucosidase purificada. A glicose é então determinada especificamente usando um reagente de oxidase/peroxidase de glicose. Como as farinhas de cevada contêm apenas baixos níveis de glicose e os maltossacarídeos não interferem no ensaio, a remoção de açúcares de baixo d.p. não é necessária. Valores em branco são determinados para cada amostra, permitindo a medição direta do β-glucano em amostras de malte. A α-amilase não interfere no ensaio. O método é adequado para a análise rotineira de β-glucano em amostras de cevada derivadas de programas de melhoramento; 50 amostras podem ser analisadas por um único operador em um dia. A avaliação da técnica em diferentes dias indicou um erro padrão médio de 0–1 para amostras de farinha de cevada contendo 3–8 e 4–6% (p/p) de conteúdo de β-glucano.