Quantificação Rápida e Precisa do RNA do HIV-1 no Plasma Usando um Assay de Amplificação de Sinal de DNA Ramificado

O nível de RNA do vírus da imunodeficiência humana tipo 1 (HIV-1) no plasma humano foi quantificado diretamente com o uso de um ensaio de hibridização de nucleotídeos em fase sólida, baseado na tecnologia de amplificação de sinal de DNA ramificado (bDNA) com detecção quimioluminescente. A amplificação do sinal é realizada pela incorporação de locais para 1.755 sondas rotuladas com fosfatase alcalina por genoma de HIV-1, após hibridação sucessiva de oligonucleotídeos específicos para o alvo e moléculas amplificadoras de bDNA. O ensaio é realizado em microplacas, de forma semelhante a um ensaio imunoenzimático, e é adequado para uso rotineiro em laboratório. Estudos de reprodutibilidade e especificidade indicaram que o método bDNA foi preciso e não apresentou reatividade com doadores soronegativos. Os níveis de RNA do HIV-1 foram quantificados para 348 espécimes soropositivos, com uma taxa de detecção de 83% para aqueles espécimes de pacientes com < 500 contagens de células T CD4+. Os níveis de RNA no plasma mostraram-se alterar com o estágio da doença e em resposta à terapia antiviral. A quantificação do RNA do HIV-1 no plasma de pacientes infectados pelo HIV-1, com o uso do ensaio bDNA, pode ser um método útil para o monitoramento da progressão da doença HIV-1 e da resposta terapêutica.