Citometria de fluxo multicolorida e sequenciamento de próxima geração multigene são complementares e altamente preditivos para recaída em leucemia mieloide aguda após transplante alogênico

A doença residual mínima (DRM) em leucemia mieloide aguda (LMA) é tipicamente medida usando citometria de fluxo multiparamétrica (CFM). A detecção de mutações leucêmicas usando sequenciamento de próxima geração (NGS) multigene pode ser potencialmente usada para medir a doença residual. Utilizamos um painel de NGS com 28 genes direcionados para detectar mutações e CFM 10-colorido diferente do normal para medir a DRM em pacientes com LMA antes do transplante de células-tronco hematopoéticas alogênicas (TCTH). A doença residual foi definida quando qualquer população de blastos anormais foi detectada usando CFM e quando qualquer alelo leucêmico foi detectado com uma frequência de alelo variante (FAV) ≥ 5% usando NGS. Acompanhamos a eliminação de alelos leucêmicos entre o diagnóstico de LMA e imediatamente antes do TCTH e descobrimos que mutações em DNMT3A, TET2 e JAK2 tinham menor probabilidade de serem eliminadas do que NPM1, IDH 1/2 e FLT3-ITD. Apesar das sensibilidades variadas, a taxa de concordância da detecção de doença residual antes do TCTH usando os 2 testes foi de 44 de 62 (71%) casos avaliáveis. A discordância pode ser explicada por mutações residuais em DNMT3A e TET2 que não foram detectadas por CFM e a presença de mutações leucêmicas residuais com FAV abaixo dos limiares estabelecidos para a chamada de mutação. A presença de DRM flow e mutações residuais imediatamente antes do TCTH usando os 2 testes estava associada ao risco de recaída (CFM: razão de risco, 4.62; intervalo de confiança de 95% CI, 1.32 a 16.09; P = .016 e NGS: razão de risco, 4.35; 95% CI, 1.63 a 11.6; P = .003) e sobrevida (CFM: razão de risco, 2.44; 95% CI, 1 a 5.97; P = .05 e NGS: razão de risco, 2.1; 95% CI, .97 a 4.55; P = .059) após TCTH. A doença residual detectada simultaneamente por CFM e NGS conferiu o maior risco de recaída em comparação com pacientes que eram negativos em ambos os testes ou apresentavam status discordante (geral, P = .008). Embora a CFM seja universalmente aplicável, uma abordagem multigene de NGS para medir a doença residual em LMA fornece informações adicionais sobre a eliminação diferencial de alelos da doença e pode avaliar a arquitetura clonal antes do transplante.