Uso de Locais de Reconhecimento FRT Mutados para a Troca de Cassetes de Expressão em Loci Cromossômicos Definidos

Usando o sistema FLP/FRT para recombinação específica de locais e o sítio de reconhecimento do tipo selvagem (FRT) em conjunto com certos sítios FRT mutantes, torna-se possível provocar, com alta eficiência, um evento de crossover duplo-reciproco em células de mamíferos cultivadas. Demonstra-se que essa tecnologia permite o direcionamento de cassetes de expressão para locais de referência cromossômicos apropriados na célula receptora para melhorar os conceitos de genética reversa. O desenho de sítios FRT mutantes que promovem tal processo será delineado. Nossos resultados mostram que as cinco mutações de espaçadores testadas são funcionais como o tipo selvagem, mas diferem na extensão de sua recombinação cruzada, que deve ser minimizada para seu uso simultâneo.