Análise Genética da Resistência à Colistina em Salmonella enterica Sorovar Typhimurium

A colistina é um peptide catiônico cíclico que mata bactérias gram-negativas ao interagir e desestabilizar a membrana externa. Isolamos 44 mutantes independentes em Salmonella enterica sorovar Typhimurium com suscetibilidade reduzida à colistina e identificamos 27 diferentes mutações missense localizadas nos genes pmrA e pmrB (que codificam o regulador e sensor de um sistema regulatório de dois componentes) que conferiram resistência aumentada. Ao compararmos as duas quinases sensoras homólogas, PmrB e EnvZ, as 22 mutações missense identificadas em pmrB foram mostradas como localizadas em quatro diferentes domínios estruturais da proteína. Todas as cinco mutações de pmrA estavam localizadas no domínio receptor de fosfato da proteína reguladora. Os mutantes apareceram com uma taxa de mutação de 0,6 x 10(-6) por célula por geração. As CIMs de colistina para os mutantes aumentaram de 2 a 35 vezes, e a extensão da morte foi reduzida em várias ordens de magnitude em comparação com a cepa suscetível. As taxas de crescimento dos mutantes foram levemente reduzidas em meio rico e em meio minimal M9-glicerol, enquanto o crescimento em camundongos parecia não ser afetado pelas mutações pmrA e pmrB. Os baixos custos de aptidão e a alta taxa de mutação sugerem que mutantes com suscetibilidade reduzida à colistina poderiam emergir em ambientes clínicos.