Redutase de NADPH-sulfito de Escherichia coli. Uma flavina redutase que participa da geração do radical livre da ribonucleotídeo redutase.

A proteína R2, a subunidade pequena da ribonucleotídeo redutase de Escherichia coli, contém um radical livre essencial localizado na tirosina 122 de sua cadeia polipeptídica. Quando esse radical é neutralizado por hidroxiureia, a enzima é transformada em uma forma inativa, metR2. E. coli contém uma NAD(P)H:flavina oxidoredutase, chamada Fre, absolutamente necessária para a regeneração do radical e a ativação do metR2 em R2. Consequentemente, uma linhagem mutante de E. coli que carece de um gene fre ativo é mais sensível à hidroxiureia durante o crescimento, demonstrando a função protetora fisiológica de Fre contra a perda do radical. No entanto, esse gene não é essencial, e encontramos que E. coli contém uma segunda atividade geradora de radical de tirosila, também residente em uma flavina redutase. A enzima foi purificada 200 vezes até homogeneidade e se mostrou idêntica à redutase de sulfito. A redutase de sulfito pura tem a capacidade de catalisar a redução de riboflavina livre, FMN ou FAD por NADPH e, assim, como Fre, transferir elétrons para o centro de ferro do metR2, um passo chave durante a reação de ativação.