EEA1, uma proteína associada a endossomos precoces.

Os endossomos precoces são compartimentos celulares que recebem material endocitado e o separam para transporte vesicular para endossomos tardios e lisossomos ou para reciclagem para a membrane plasmática. Clonamos um cDNA humano que codifica uma proteína de 180 kDa, evolutivamente conservada, associada a endossomos precoces, denominada EEA1 (Antígeno de Endossomo Precoce 1). EEA1 está associada a endossomos precoces, uma vez que co-localiza por imunofluorescência com o receptor de transferrina e com Rab5, mas não com Rab7. A microscopia eletrônica de imunotransmissão mostra que está associada a endossomos tubulovesiculares precoces contendo albumina bovina interna-gold. EEA1 é uma proteína de membrana periférica hidrofílica, presente nas frações de citosol e membrana. Ela se partitiona na fase aquosa após a solubilização com Triton X-114 e é extraída das membranas por NaCl 0,3 M. É uma proteína predominantemente alfa-helical que compartilha 17-20% de identidade de sequência com as miosinas e contém um motivo IQ de ligação à calmodulina. Está flanqueada por motivos de “dedo” de cisteína de ligação a metais. Os dedos COOH-terminal, Cys-X2-Cys-X12-Cys-X2-Cys e Cys-X2-Cys-X16-Cys-X2-Cys, estão presentes dentro de uma região que é surpreendentemente homóloga à proteína FAB1 de Saccharomyces cerevisiae, necessária para a endocitose, e com o ZK632 de Caenorhabditis elegans. Esses dedos também mostram conservação limitada com as proteínas VAC1, Vps11 e Vps18p de S. cerevisiae implicadas no transporte vacuolar. Propomos que EEA1 é necessária para o transporte vesicular de proteínas através de endossomos precoces e que seus motivos em dedo são necessários para essa atividade.