Aptâmeros contra Células que Superexpressam Glicopartícula 3 de Sistemas Genéticos Expandidos Combinados com Engenharia Celular e Evolução em Laboratório

A evolução in vitro em laboratório (LIVE) pode gerar aptâmeros de DNA que se ligam a proteínas expressas na superfície das células. Neste trabalho, utilizamos engenharia celular para colocar a glicopartícula 3 (GPC3), um possível marcador para terapias e diagnósticos do câncer de fígado, na superfície de uma linha celular hepática. Bibliotecas foram então construídas a partir de um alfabeto genético de seis letras contendo as nucleobases padrão e duas nucleobases adicionais (2-amino-8H-imidazo1,2-a1,3,5-triazin-4ona e 6-amino-5-nitropiridina-2-ona), complementos de Watson-Crick de um sistema de informação genética artificialmente expandido (AEGIS). Com contrasseleção contra células não engenheiradas, oito aptâmeros contendo AEGIS foram recuperados. Cinco se ligaram seletivamente a células que superexpressam GPC3. Este esquema de seleção-contrasseleção apresentou estatísticas aceitáveis, não obstante a possibilidade de que células engenheiradas para superexpressar GPC3 também pudessem expressar diferentes proteínas fora do alvo. Este é o primeiro exemplo de tal combinação.