Impressão de Proteínas como Microarrays para Determinação de Função em Alto Rendimento

Esforços sistemáticos estão atualmente em andamento para construir conjuntos definidos de genes clonados para expressão e purificação em alto rendimento de proteínas recombinantes. Para facilitar estudos subsequentes da função da proteína, desenvolvemos ensaios miniaturizados que acomodam volumes de amostra extremamente baixos e permitem o processamento rápido e simultâneo de milhares de proteínas. Um robô de alta precisão projetado para fabricar microarrays de DNA complementar foi utilizado para aplicar proteínas em lâminas de vidro quimicamente derivatizadas com densidades espaciais extremamente altas. As proteínas se ligaram covalentemente à superfície da lâmina, mas mantiveram sua capacidade de interagir especificamente com outras proteínas, ou com pequenas moléculas, em solução. Três aplicações para microarrays de proteínas foram demonstradas: triagem de interações proteína-proteína, identificação dos substratos de quinases de proteínas e identificação dos alvos proteicos de pequenas moléculas.