A superexpressão de estomatina deprime a atividade do transportador de glicose GLUT-1

Mostramos anteriormente que o transportador de glicose GLUT-1 está associado à estomatina (banda 7.2b) nas membranas de glóbulos vermelhos humanos e nas células Clone 9. Aqui mostramos que em uma população mista de células transfectadas estavelmente, a superexpressão de estomatina murina ou humana resultou em uma redução de 35-50% na taxa basal de transporte de glicose. Além disso, houve uma correlação entre o aumento da expressão de estomatina e a depressão na taxa de transporte de glicose. Em dois clones escolhidos para estudo adicional, a redução de ~10% e ~70% na taxa basal de transporte de glicose foi associada a aumentos na expressão de mRNA e proteína de estomatina, sem uma mudança detectável no conteúdo de GLUT-1 nas membranas plasmáticas de nenhum dos clones. No clone que superexpressa altos níveis de estomatina, o GLUT-1 imunoprecipitado estava associado a uma grande quantidade de estomatina como coimunoprecipitado. Empregando extratos de células que superexpressam estomatina humana, encontramos que a estomatina se ligou à proteína de fusão glutatião-S-transferase (GST) contendo o segmento COOH-terminal de 42 aminoácidos do GLUT-1, mas não ao GST sozinho ou a uma proteína de fusão GST contendo o laço central de 66 aminoácidos do GLUT-1. O cDNA de estomatina de rato foi clonado por RT-PCR e encontrado altamente homólogo à estomatina de camundongo (97%) e humana (86%). Esses resultados sugerem que a superexpressão de estomatina resulta em uma depressão na taxa basal de transporte de glicose ao diminuir a atividade "intrínseca" do GLUT-1, provavelmente através da interação proteína-proteína.