Caracterização Molecular da Resistência Intrínseca e Adquirida a Antibióticos em Bactérias Ácicas Láticas e Bifidobactérias

As concentrações inibitórias mínimas (CIMs) de 6 antibióticos diferentes (cloranfenicol, clindamicina, eritromicina, estreptomicina, tetraciclina e vancomicina) foram determinadas para 143 cepas de bactérias ácidas lácticas e bifidobactérias usando o Etest. Diferentes CIMs foram encontradas para diferentes espécies e cepas. Com base na distribuição desses valores de CIM, a maioria das cepas era susceptível ou intrinsecamente resistente a esses antibióticos. No entanto, a faixa de CIM de alguns desses antibióticos mostrou uma distribuição bimodal, o que sugeriu que algumas das cepas testadas possuem resistência a antibióticos adquirida. O rastreamento de genes de resistência foi realizado por PCR usando primers específicos ou usando uma microarray de DNA com cerca de 300 sondas nucleotídicas representando 7 classes de genes de resistência a antibióticos. Os genes identificados codificavam resistência à tetraciclina tet(M), tet(W), tet(O) e tet(O/W), eritromicina e clindamicina erm(B) e estreptomicina aph(E) e sat(3). Porções internas de alguns desses determinantes foram sequenciadas e encontradas idênticas aos genes descritos em outras bactérias. Todos os determinantes de resistência estavam localizados no cromossomo bacteriano, exceto por tet(M), que foi identificado em plasmídeos em Lactococcus lactis. A contribuição de transportadores multidrogas intrínsecos para a resistência a antibióticos foi investigada pela clonagem e medição da expressão dos genes de Bifidobacterium breve em L. lactis.