Síntese Microfluídica de Nanopartículas Lipídicas de Tamanho Limite Altamente Potentes para Entrega In Vivo de siRNA

Nanopartículas lipídicas (LNP) são os sistemas líderes para entrega in vivo de RNA pequeno interferente (siRNA) para aplicações terapêuticas. A formulação de sistemas LNP-siRNA requer a mistura rápida de soluções contendo lipídios catiônicos com soluções contendo siRNA. Os procedimentos de formulação atuais utilizam processos de mistura macroscópica para produzir sistemas com diâmetro de 70 nm ou maior, que têm eficiência de encapsulação de siRNA, homogeneidade e reprodutibilidade variáveis. Aqui, mostramos que técnicas de mistura microfluídica, que permitem mistura em milissegundos em escala de nanolitros, podem gerar de forma reprodutível sistemas LNP-siRNA de tamanho limite de 20 nm e maiores com encapsulação essencialmente completa de siRNA em uma ampla gama de condições, com índices de polidispersidade tão baixos quanto 0,02. Sistemas LNP-siRNA otimizados produzidos por mistura microfluídica alcançaram 50% de silenciamento do gene alvo em hepatócitos a um nível de dosagem de 10 µg/kg de siRNA em camundongos. Prevemos que a mistura microfluídica, uma técnica controlada com precisão e facilmente escalável, se tornará o método preferido para a formulação de sistemas de entrega LNP-siRNA.