As proteínas secretadas de Cryptosporidium formam uma interface em camadas complexa com a célula hospedeira

Cryptosporidium parvum, uma das principais causas de morte diarréica em crianças, remodela seu local de infecção por meio de proteínas efetoras secretadas. Várias delas se acumulam na interface hospedeiro-parasita, formando uma estrutura complexa cuja função e importância para a infecção permanecem pouco compreendidas. Aqui, localizamos e caracterizamos funcionalmente a proteína putativa de grânulos densos DG8. Confirmamos que a proteína está nos grânulos densos, formando uma estrutura em anel ao ser secretada na interface hospedeiro-parasita. A deleção de DG8 mostrou redução da infecção em camundongos in vivo e um defeito precoce in vitro, revelando a importância do DG8 para a aptidão do parasita. Proteínas secretadas adicionais foram identificadas como parceiros potenciais, entre as quais a SG4, uma proteína de grânulos pequenos, mostrou co-localização parcial com DG8. Aplicando microscopia de expansão de ultraestrutura em seções intestinais com anticorpos recém-gerados contra DG8 e SG4, conseguimos posicionar precisamente a estrutura em anel acima da banda eletricamente densa, ao redor do organóide alimentador na base da membrana do vacúolo parasitóforo, com uma resolução sem precedentes. No geral, uma melhor visualização e compreensão da interface hospedeiro-parasita por meio de tecido intestinal expandido e caracterização de efetores revela uma interface hospedeiro-parasita complexa e essencial em camadas.