Agregados Solúveis de Beta-amiloide de Cérebros de Pacientes com Doença de Alzheimer

Os agregados solúveis de beta-amiloide (Aβ) provavelmente contribuem substancialmente para a demência que caracteriza a doença de Alzheimer. No entanto, apesar do estudo intensivo de preparações in vitro e modelos animais, pouco se sabe sobre as características dos agregados solúveis de Aβ no cérebro humano afetado pela doença de Alzheimer. Aqui apresentamos um novo método para extrair agregados solúveis de Aβ de cérebros humanos, separando-os dos agregados insolúveis e monômeros de Aβ usando ultracentrifugação diferencial, e purificando-os mais de 6000 vezes por imunoprecipitação com anticorpos duais. O método resultou em menos de 40% de perda do material inicial, nenhuma agregação ex vivo detectável do Aβ monomérico e nenhuma alteração ex vivo aparente nos tamanhos dos agregados solúveis. Por meio de microscopia eletrônica de imunoterapia, os agregados solúveis de Aβ normalmente aparecem como aglomerados de estruturas ovoides de 10-20 nanômetros de diâmetro com 2-3 locais de ligação de anticorpos contra Aβ na extremidade amino-terminal, distintos das estruturas previamente caracterizadas. Essa abordagem pode facilitar a investigação das características dos agregados solúveis nativos de Aβ, aprofundando nossa compreensão da demência de Alzheimer.