Análise clonal da resposta de linhas celulares leucêmicas mieloides humanas à atividade de estímulo de colônias

O recente desenvolvimento de duas linhas celulares leucêmicas mieloides humanas que proliferam continuamente (HL-60 e KG-1) e que respondem à CSA oferece uma oportunidade para um estudo detalhado da interação da CSA com células mieloides leucêmicas. Aqui, relatamos sobre a capacidade de formação de colônias de HL-60 e KG-1 ao longo de uma vida útil de cultura prolongada das células. Várias fontes diferentes de CSA humana de diferentes estágios de pureza aumentaram a formação de colônias dessas células. A CSA, obtida de meios condicionados de um trofoblasto humano transformado por SV-40, foi parcialmente purificada, e sua atividade para medula óssea normal copurificada com a atividade que estimulou a formação de colônias de HL-60. Mais de 100 clones de HL-60 foram desenvolvidos e testados quanto à sua resposta à CSA. Todos responderam à CSA mostrando um aumento no tamanho e número de colônias. No entanto, nenhuma das colônias formadas a partir de qualquer um dos 100 clones diferenciou em resposta à CSA, apesar do fato de que muitos compostos químicos podem induzir a diferenciação de HL-60. Uma vez que HL-60 forma colônias espontâneas sem a adição de qualquer fator estimulante exógeno, meios condicionados de HL-60 e extratos celulares foram testados quanto à produção por essas células de sua própria atividade promotora de crescimento endógena (como uma molécula semelhante à CSA). Nenhuma atividade endógena promotora de crescimento foi encontrada que estimulasse a formação de colônias de medula óssea normal ou de HL-60, mesmo após a utilização de métodos de concentração e fracionamento. Esses experimentos sugerem que: (1) o efeito da CSA favorece marcadamente a proliferação em detrimento da diferenciação nessas linhas celulares; (2) é improvável que a CSA iniba o crescimento do tipo de células mieloides leucêmicas que HL-60 e KG-1 representam; e (3) se as células HL-60 produzem seu próprio fator promotor de crescimento, este não é detectável nos meios.