Purificação e Propriedades da Ligase de RNA Induzida pelo Bacteriófago T4

Uma enzima, purificada 300 vezes a partir de Escherichia coli infectada com o bacteriófago T4, catalisa a conversão dos terminais 5' dos polirribonucleotídeos em ligações fosfodiéster internas. A reação requer ATP e Mg(++). Para cada terminal 5'-(32)P tornado resistente à fosfatase alcalina, uma quantidade igual de AMP e PPi é formada. Vários polirribonucleotídeos são substratos na reação; até o momento, o melhor substrato é 5'-(32)Ppolirriboadenilato. Com este substrato, nenhuma evidência de reação intermolecular foi obtida. No entanto, os terminais 5'-(32)P de poli(A) tornados resistentes à fosfatase alcalina também são resistentes ao ataque por RNase II, polinucleotídeo fosforilase e baixas concentrações de fosfodiesterase de veneno. Como o produto formado com poli(A) carece de extremidades 3'-hidroxila, conforme medido com esses exonucleases, a enzima parece converter moléculas lineares de polirriboadenilato em uma forma circular mediante a ligação covalente intramolecular do fim 5'-fosfato ao terminal 3'-hidroxila.