Complexidade da resposta genética inicial a fatores de crescimento em fibroblastos de camundongo.

Genes cuja expressão é regulada por fatores de crescimento são provavelmente componentes importantes nos mecanismos que controlam a proliferação e a diferenciação celular. Com o objetivo de identificar alguns desses genes, uma biblioteca de cDNA lambda foi preparada com RNA poli(A)+ de células NIH 3T3 em quiescência estimuladas com soro por 4 horas na presença de cicloheximida. A triagem diferencial de aproximadamente 200.000 placas de fagos recombinantes revelou 2.540 clones que hibridizaram preferencialmente com 32PcDNA derivado de RNA de células estimuladas, em vez de com cDNA derivado de células não estimuladas. A hibridização cruzada desses clones identificou 82 sequências independentes, incluindo c-fos e c-myc. Setenta e um clones foram estudados mais detalhadamente. A análise das mudanças na transcrição e nos níveis de mRNA após a estimulação com soro demonstrou que a cinética e a extensão da indução variam dramaticamente entre os diferentes genes. A ciclodexamina, em todos os casos, superinduziu os níveis de mRNA por dois mecanismos, inibindo a interrupção da transcrição e prolongando as meia-vidas dos mRNAs. Nossos resultados mostraram que a indução da proliferação é acompanhada pelo início de um programa genético complexo.