Células T com Receptor de Antígeno Quimérico com Domínios de Sinalização Dissociados Apresentam Atividade Antitumoral Focada com Potencial Reduzido de Toxicidade In Vivo

A imunoterapia adotiva usando linfócitos T geneticamente modificados para expressar um receptor de antígeno quimérico (CAR-T) apresenta uma promessa considerável para o tratamento do câncer. No entanto, as terapias baseadas em CAR podem envolver toxicidade no alvo contra tecidos normais que expressam baixas quantidades do antígeno associado ao tumor (TAA) visado. Para especificar as células T para uma função efetora robusta que é seletiva para o tumor, mas não para o tecido normal, desenvolvemos uma estratégia de CAR de sinalização trans, onde o sinal de ativação da célula T 1 (CD3z) é fisicamente dissociado do sinal coestimulatório 2 (CD28) em dois CARs de especificidade de antígeno diferente: mesotelina e receptor de a-folato (FRa). Células T humanas foram geneticamente modificadas para co-expressar os CARs de sinal 1 (anti-Meso scFv-CD3z) e sinal 2 (anti-FRa scFv-CD28) em trans. As células CAR-T de sinalização trans mostraram fraca secreção de citocinas contra células-alvo que expressam apenas um TAA in vitro, semelhante às células CAR-T de primeira geração que apresentam apenas CD3z, mas mostraram secreção de citocinas aumentada ao encontrar células tumorais naturais ou engenheiradas co-exprimindo ambos os antígenos, equivalente ao das células CAR-T de segunda geração com sinalização dupla em cis. Células CAR-T com dupla especificidade também mostraram potente atividade anticâncer e persistência in vivo, que foi superior às células CAR-T de primeira geração e equivalente aos CARs de segunda geração. Importante, as células CAR-T de segunda geração exibiram atividade potente contra células que expressam apenas mesotelina, recapturando o tecido normal, enquanto as células CAR-T de sinalização trans não. Assim, uma abordagem de CAR de sinalização trans e dupla especificidade pode potencializar a eficácia terapêutica das células CAR-T contra o câncer, minimizando a reatividade paralela contra tecidos normais portadores de antígeno único.