Caracterização das Fosfodiesterases de Nucleotídeos Cíclicos de Tecidos de Rato

Resumo A fosfodiesterase de nucleotídeos cíclicos foi preparada a partir do fígado, músculo esquelético, músculo cardíaco, rins, tecido adiposo epididimal e córtex cerebral do rato. A análise cinética indicou que todos esses tecidos, com exceção do fígado, exibem comportamento complexo indicativo de múltiplas atividades enzimáticas. As atividades da fosfodiesterase do córtex cerebral, rins e tecido adiposo foram separadas em colunas de filtração em gel Bio-Gel A-1,5m em três frações. Estas são uma fração excluída, uma fração de alto peso molecular na qual a afinidade enzimática por monofosfato de guanosina cíclico 3',5' é maior do que a do monofosfato de adenosina cíclico 3',5', e uma fração de baixo peso molecular com alta afinidade por monofosfato de adenosina cíclico 3',5'. A enzima de menor peso molecular parece ser negativamente cooperativa. As preparações musculares têm pouca, se é que têm, da fração excluída, que nos rins, tecido adiposo e cérebro apresenta comportamento cinético semelhante ao da enzima de menor peso molecular. O fígado não apresenta atividade fosfodiesterásica detectável, exceto na fração intermediária, que tem um peso molecular de aproximadamente 400.000. Esta atividade enzimática foi purificada 88 vezes por centrifugação, fracionamento por sulfato de amônio e filtração em gel. O potencial de controle metabólico por meio da regulação da fosfodiesterase de nucleotídeos cíclicos é discutido à luz da existência de pelo menos duas atividades enzimáticas distintas em todos os tecidos estudados, exceto o fígado.