Proteína Morfogenética Óssea (BMP) Solubilizada de Osteossarcoma de Rato e Matriz Óssea Desmineralizada de Rato

Uma seleção de proteínas, incluindo a proteína morfogenética óssea (BMP), foi extraída em uma forma desagregada do osteossarcoma Dunn ou da matriz óssea desmineralizada de rato por solução de cloridrato de guanidina 4M (GuHCl) sem perder sua atividade biológica. Os extratos de GuHCl do osteossarcoma Dunn foram divididos em 4 frações diferentes por gradientes de densidade de cloreto de césio (CsCl). Em uma condição dissociativa, o maior rendimento de novo osso foi obtido na fração de um terço superior de baixa densidade, e a atividade da BMP diminuiu com o aumento da densidade de cada fração. Nenhum potencial de BMP foi observado na fração de gel superficial sob condições dissociativas. Sob uma condição associativa (baixas concentrações de GuHCl), a atividade da BMP aparece na fração de gel superficial, enquanto sob uma condição dissociativa (altas concentrações de GuHCl) a BMP aparece na fração abaixo do gel superficial. Esses fatos sugerem que sob condições associativas, a BMP se agrega a outras proteínas de baixa densidade na fração de gel superficial e que este pode ser o estado de agregação da BMP em células e matriz na natureza. As observações atuais apoiam a suposição de que a BMP é uma proteína de densidade relativamente baixa e excluem a ideia de atividade da BMP na molécula de colágeno, por si só. Uma proteína específica, com um peso molecular aparente de 63.000 daltons, está presente em todas as frações que exibem atividade de BMP, e ausente em frações que não exibem essa atividade. A BMP não é específica de espécie; a BMP de rato induz a formação óssea em camundongos. A centrifugação em gradiente de densidade de CsCl é uma ferramenta eficiente para purificação e isolamento adicional da BMP.