Um Imunotoxina Recombinante Bispecífica, DT2219, Direcionada aos Receptores Humanos CD19 e CD22 em um Modelo Xenográfico de Camundongo de Leukemia/Linfoma de Células B

Uma nova proteína de fusão bispecífica de cadeia única, DT2219, foi montada consistindo nos domínios catalítico e de translocação da toxina diftérica (DT(390)) fundidos a duas subunidades repetidas de sFv que reconhecem CD19 e CD22, expressa em Escherichia coli. Problemas com rendimento, pureza e agregação na etapa de renaturação foram resolvidos pela incorporação de um segmento de aldolase muscular humana e pelo uso de um procedimento de renaturação baseado em detergente de sarcosina N-lauroil-sódica. Problemas com a eficácia reduzida foram abordados ao combinar o anti-CD19 e o anti-CD22 na mesma molécula de cadeia única. DT2219 teve uma atividade anticancerígena maior do que imunotoxinas monoméricas ou bivalentes feitas apenas com anti-CD19 e anti-CD22 sFv e mostrou um nível de ligação mais alto às células de leucemia do paciente e às células CD19(+)CD22(+) Daudi ou Raji do que os anticorpos monoclonais parentais anti-CD19 e anti-CD22. O DT2219 resultante, mutado para aumentar sua avididade, foi citotóxico para células Daudi in vitro (IC(50) = 0,3 nmol/L). In vivo, DT2219 foi eficaz em um modelo de terapia de tumor na região lateral no qual inibiu significativamente o crescimento do tumor (P < 0,05) e em um modelo sistêmico no qual prolongou significativamente a sobrevivência de camundongos severamente imunodeficientes com Daudi estabelecidos (P < 0,008) em comparação com os controles. DT2219 tem uma reatividade mais ampla em reconhecer malignidades de células B, possui maior poder de destruição e requer menos toxina do que o uso de imunotoxinas individuais, o que justifica uma investigação adicional como um novo fármaco para tratar leucemia/linfoma B.