Propriedades cinéticas e especificidades de substrato de duas celulases de epicótilos de ervilha tratados com auxina.

Duas celulases purificadas de regiões em crescimento de ervilhas tratadas com auxina (solúvel em tampão e insolúvel em tampão) hidrolisam pó de celulose, carboximetilcelulose (CM-celulose) parcialmente substituída, celodextrinas de alto peso molecular e certos glucanos de ligações mistas (por exemplo, beta-glucano de cevada), a taxas comparáveis às reportadas para as celulases fúngicas mais ativas, e com cinética e formação de produtos características da ação de endohidrolases. Elas são incapazes de cleavar ligações 1,3 em beta-glucanos, ou ligações 1,4 em dextrinas que contêm substituição excessiva em C6, configuração alfa, alternando ligações beta-1,3 e 1,4, ou resíduos diferentes de anidroglucose. Elas não são ativas em relação à celobiose ou à ligação 1,4 adjacente à extremidade redutora de cadeias de celodextrinas. Conclui-se que as celulases solúveis e insolúveis em tampão são verdadeiras beta-1,4-glucano 4-glucanohidrolases (EC 3.2.1.4). Em base molar, os valores de Vmax para a celulase insolúvel em tampão são mais altos do que para a celulase solúvel em tampão agindo em qualquer um dos substratos testados, mas os valores de Km em relação à CM-celulose e cellohexaose são essencialmente idênticos. Ambas as celulases foram inibidas por C12+, Hg2+ e reagentes que ligam sulfidrila. A celulose insolúvel em tampão, mas não a solúvel em tampão, foi inativada por reagentes que ligam serina e treonina, o que reflete diferenças em sua composição de aminoácidos. Nenhuma diferença qualitativa importante foi detectada no modo de ação das duas enzimas. Apesar de diferenças marcantes em suas propriedades físicas e imunológicas, as semelhanças próximas entre as propriedades enzimáticas solúveis e insolúveis em tampão sugerem que seus sítios ativos são os mesmos.