O Transativador BTas do Vírus Espumoso Bovino Interage com RelB Celular para Aumentar a Transcrição Viral

Os vírus são parasitas intracelulares obrigatórios que dependem da maquinaria celular para a sua transcrição e replicação eficazes. Em um estudo anterior, reportamos que o vírus espumoso bovino (BFV) é capaz de ativar a via do fator nuclear κB (NF-κB) através da ação de seu transativador BTas para aumentar a transcrição viral. No entanto, o mecanismo utilizado pelo NF-κB para aumentar a transcrição do BFV permanece obscuro. Para abordar essa questão, empregamos um ensaio de duas-híbridas em levedura para rastrear proteínas que interagem com BTas. Descobrimos que RelB, um membro da família de proteínas NF-κB, interage com BTas. Confirmamos a interação putativa RelB-BTas in vitro e in vivo e identificamos as regiões proteicas responsáveis pela interação RelB-BTas. Usando um ensaio de repórter de luciferase, mostramos em seguida que RelB aumenta a transcrição do BFV (transativação do LTR induzida por BTas) e que esse processo requer tanto a localização da interação RelB-BTas no núcleo quanto o domínio de homologia Rel de RelB. A redução da proteína RelB endógena celular utilizando RNA pequeno interferente (siRNA) atenuou significativamente a transcrição do LTR induzida por BTas. Os resultados da análise de imunoprecipitação de cromatina (ChIP) mostraram que a RelB endógena se liga ao LTR viral em células infectadas por BFV. Juntos, esses resultados sugerem que o BFV emprega a proteína RelB como um co-transativador de BTas para aumentar a transcrição viral. Além disso, nossas descobertas indicam que a infecção por BFV regula para cima a expressão de RelB celular através da ativação do NF-κB induzida por BTas. Assim, este estudo demonstra a existência de um circuito de retroalimentação positiva no qual o BFV utiliza a via NF-κB do hospedeiro através da proteína RelB para uma transcrição viral eficiente.