Tirosinase de mamíferos: biossíntese, processamento e modulação pelo hormônio estimulador de melanócitos.

Examinamos a taxa de síntese e degradação da tirosinase (monofenol, 3,4-dihidroxifenilalanina:oxidação oxidoreductase, EC 1.14.18.1), a enzima crítica envolvida na pigmentação de mamíferos, usando rotulagem metabólica por pulso e rastejo de células de melanoma murinas e imunoprecipitação de extratos de proteína com anticorpos direcionados especificamente contra a enzima. Descobrimos que a tirosinase é sintetizada e glicosilada nas melanócitos rapidamente, uma vez que quantidades significativas de enzima rotulada por pulso puderam ser detectadas dentro de 30 min. A quantidade máxima de enzima foi processada em 4 horas, e o t1/2 da tirosinase in vivo foi de 10 horas (comparado a 120 horas com enzima purificada), sugerindo que a atividade da tirosinase nas melanócitos é regulada em parte pela síntese rápida e degradação ativa. Também examinamos a estimulação melanogênica causada pelo hormônio estimulador de melanócitos, usando rotulagem metabólica, ensaios radiométricos e técnicas de imunofluorescência; as células respondentes aumentaram seu potencial melanogênico mais de 7 vezes em 4 dias sem aumentar seus níveis de síntese de tirosinase. Os resultados demonstram que existe um pool de tirosinase inativa nas melanócitos e que aumentos rápidos na atividade da enzima provocados pelo hormônio estimulador de melanócitos refletem uma alteração na atividade de um pool pré-existente de tirosinase intracelular.