Vetores baseados em vírus adeno-associados (AAV)-3 transduzem células hematopoiéticas não suscetíveis à transdução com vetores baseados em AAV-2

Embora o vírus adeno-associado (AAV)-2 tenha um amplo espectro de tecidos e possa transduzir uma ampla variedade de tipos de tecidos, algumas células, como células eritro-megacarioblásticas, são não permissivas e parecem faltar o receptor de AAV-2. No entanto, estudos limitados foram relatados com o dependovírus relacionado AAV-3. Anteriormente, clonamos este vírus, caracterizamos seu genoma e produzimos um clone infeccioso. Neste estudo, o gene para a proteína fluorescente verde (GFP) foi inserido em plasmídeos baseados em AAV-2 e AAV-3 e vírus recombinantes foram produzidos. Esses vírus foram então usados para transduzir células hematopoiéticas e as eficiências de transdução foram comparadas. Em contraste com o AAV-2 recombinante (r), o rAAV-3 transduziu com sucesso células eritroides e megacarioblásticas, embora o rAAV-2 fosse superior na transdução de linhagens celulares derivadas de linfócitos. Recentemente, foi relatado que o sulfato de heparano pode agir como um receptor do AAV-2. A infectividade do rAAV-2 e rAAV-3 foi testada com linhagens celulares mutantes de células de ovário de hamster chinês que eram defeituosas para a expressão de heparina ou sulfato de heparano na superfície celular. Não houve correlação entre a capacidade do rAAV-2 ou rAAV-3 de infectar células e a expressão de sulfato de heparano na superfície celular e, embora a heparina bloqueasse tanto a transdução de rAAV-2 quanto de rAAV-3, o ID(50) do rAAV-3 foi maior do que o do rAAV-2. Além disso, ensaios de sobreposição de ligação viral indicaram que AAV-2 e AAV-3 se ligaram a diferentes proteínas de membrana. Esses resultados sugerem não apenas que existem diferentes receptores celulares para AAV-2 e AAV-3, mas que vetores de rAAV-3 podem ser preferidos para a transdução de alguns tipos celulários hematopoiéticos.